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    广西11选5分布走势图一定牛: 血管紧张素转化酶抑制肽及其制备方法和应用.pdf

    摘要
    申请专利号:

    广西11选5大小走势图 www.fnjpv.tw CN201310212991.5

    申请日:

    2013.05.31

    公开号:

    CN103242430B

    公开日:

    2014.10.08

    当前法律状态:

    授权

    有效性:

    有权

    法律详情: 授权|||实质审查的生效IPC(主分类):C07K 7/06申请日:20130531|||公开
    IPC分类号: C07K7/06; C07K1/20; C12P21/06; A61K38/08; A61P9/12 主分类号: C07K7/06
    申请人: 南京中医药大学
    发明人: 刘睿; 吴皓; 朱蕴菡; 程建明; 卞慧敏; 王令充; 王欣之
    地址: 210029 江苏省南京市汉中路282号
    优先权:
    专利代理机构: 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 代理人: 杨海军
    PDF完整版下载: PDF下载
    法律状态
    申请(专利)号:

    CN201310212991.5

    授权公告号:

    103242430B||||||

    法律状态公告日:

    2014.10.08|||2013.09.11|||2013.08.14

    法律状态类型:

    授权|||实质审查的生效|||公开

    摘要

    本发明公开了一种血管紧张素转化酶抑制肽及其制备方法和应用,该抑制肽的氨基酸序列为:Leu-Ala-Ser-Pro-Thr-Met。本发明采用现代生化技术手段,对四角蛤蜊中的抑制血管紧张素转化酶的活性成分进行跟踪筛选和评价,通过酶解、超滤、反相高效液相色谱法等纯化方法制备得到,实验结果表明,该抑制肽具有很好的抑制血管紧张素转化酶的作用,具有很好的抗高血压的功效,并且安全性能好,具有很好的应用前景。

    权利要求书

    权利要求书
    1.   一种血管紧张素转化酶抑制肽,其特征在于,该抑制肽具有下述的氨基酸序列:Leu?Ala?Ser?Pro?Thr?Met。

    2.   权利要求1所述的血管紧张素转化酶抑制肽的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
    (1)四角蛤蜊酶解物的制备:
    将四角蛤蜊软体洗净泥沙,加入3至8倍量水煎煮1至3次,分离煎煮液与肉渣,沥干;取肉渣,加3至8倍量水匀浆后,加入酶酶解,酶的加入重量为肉渣重量的0.01%?2.0%,酶解的温度为37至50 ℃,酶解的pH为 7至9,酶解反应时间为2至6 h;酶解结束后于沸水浴灭活,然后离心,取上清液;
    (2)超滤纯化:
    取步骤(1)酶解得到的上清液,用0.45 μm微孔滤膜抽滤,抽滤液透过平板膜进行超滤,取分子量小于3k Da的部分,浓缩,冷冻干燥,得到冻干粉;
    (3)反向色谱分离纯化:
    取步骤(2)超滤后的冻干粉以甲醇溶解,经过反相高效液相色谱分离, 流动相为;A相:甲醇,B相:体积浓度为0.05%三氟乙酸水溶液,洗脱程序为:0至15分钟,A相甲醇体积由2%至40%洗脱,流速:20mL/min;柱温:30 ℃,检测波长为220nm,收集保留时间约为5.4min的色谱峰,冷冻干燥,得到血管紧张素转化酶抑制肽。

    3.   根据权利要求2所述的血管紧张素转化酶抑制肽的制备方法,其特征在于,所述的酶为胰蛋白酶,所述胰蛋白酶活性为10000至50000U/g。

    4.   根据权利要求2所述的血管紧张素转化酶抑制肽的制备方法,其特征在于,所述的酶的加入重量为肉渣重量的1.0%,酶解的温度为48 ℃,酶解的pH为 8.5,酶解反应时间为2h。

    5.   权利要求1所述的血管紧张素转化酶抑制肽在制备防治高血压药物中的应用。

    关 键 词:
    血管 紧张 转化 抑制 及其 制备 方法 应用
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