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    广西11选5任三玩法: 制备具有更快生长和/或更高产量的生物.pdf

    摘要
    申请专利号:

    广西11选5大小走势图 www.fnjpv.tw CN200580025987.1

    申请日:

    2005.07.21

    公开号:

    CN101001956B

    公开日:

    2014.09.24

    当前法律状态:

    终止

    有效性:

    无权

    法律详情: 未缴年费专利权终止IPC(主分类):C12N 15/82申请日:20050721授权公告日:20140924终止日期:20160721|||授权|||实质审查的生效|||公开
    IPC分类号: C12N15/82; A01H5/00; C12N15/09; C12N5/10; C12N15/29 主分类号: C12N15/82
    申请人: 梅坦诺米克斯有限公司
    发明人: P·普齐奥; A·沙尔多南
    地址: 德国柏林
    优先权: 2004.07.31 EP 04018194.3
    专利代理机构: 北京市中咨律师事务所 11247 代理人: 黄革生;林柏楠
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    法律状态
    申请(专利)号:

    CN200580025987.1

    授权公告号:

    |||101001956B||||||

    法律状态公告日:

    2017.09.08|||2014.09.24|||2007.10.03|||2007.07.18

    法律状态类型:

    专利权的终止|||授权|||实质审查的生效|||公开

    摘要

    用于制备与参考生物比较具有更快生长和/或提高的产量的非人生物的方法,该方法包括与参考生物比较提高所述生物或其一个或多个部分中SEQ?ID?NO:2、107、125、129或137的活性。

    权利要求书

    权利要求书
    1.  用于制备与参考生物比较具有更快生长和/或提高的产量的非人生物的方法,其包括与参考生物比较提高所述生物中或其一个或多个部分中SEQ ID NO:2、107、125、129或137的活性。

    2.  权利要求1的方法,其中提高生长和产量的蛋白质由包含SEQ IDNO:2、107、125、129或137中所示序列的多肽编码,其中20个或更少的氨基酸位置可以由X替换和/或其中将20个或更少的氨基酸插入所示序列,或者由包含SEQ ID NO:4、6、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、99、101、103、105或SEQ ID NO:109、111、113、115、117、119、121、133或135中所示序列的多肽编码,其中10个或更少的氨基酸位置可以由X替换和/或其中将10个或更少的氨基酸插入所述序列。

    3.  如权利要求1所述的方法,其中SEQ ID NO:2、107、125、129或137多肽的活性通过提高所述生物中或其一个或多个部分中至少一种由这样的核酸分子编码的多肽的活性而提高,所述核酸分子包含选自如下的核酸分子:
    (aa)编码SEQ ID NO:2、107、125、129或137中所述的提高生长或产量的多肽的核酸分子或编码多肽的至少成熟形式的核酸分子;
    (bb)包含根据SEQ ID NO:1、106、124、128或136的编码序列的至少成熟多核苷酸的核酸分子;
    (cc)其序列因遗传密码简并性可衍生自根据(aa)或(bb)的核酸分子所编码的多肽序列的核酸分子;
    (dd)核酸分子,其编码的多肽序列至少20%同一于根据(aa)至(cc)的核酸分子所编码多肽的氨基酸序列;
    (ee)编码多肽的核酸分子,所述多肽通过替换、缺失和/或添加由(aa)至(dd)的核酸分子所编码多肽的氨基酸序列的一个或多个氨基酸衍生自根据(aa)至(dd)的核酸分子编码的SEQ ID NO:2、107、125、129或137多肽;
    (ff)编码由根据(aa)至(ee)的任意核酸分子所编码的SEQ ID NO:2、107、125、129、137多肽的片段或表位的核酸分子;
    (gg)包含多核苷酸的核酸分子,所述多核苷酸包含使用SEQ ID NO:96和97、122和123、126和127或者130和131或者138和139或者其组合的引物通过扩增cDNA库或基因组库所得到的核酸分子的序列;
    (hh)编码SEQ ID NO:2、107、125、129或137多肽的核酸分子,所述多肽借助抗由根据(aa)至(gg)的任意核酸分子所编码的多肽的单克隆抗体分离;
    (ii)核酸分子,其通过严格条件下使用包含根据(aa)至(hh)的任意序列或者在(aa)至(hh)中所表征核酸的至少15nt、优选地20nt、30nt、50nt、100nt、200nt或500nt片段的探针筛选适宜文库可得到,并且其编码SEQID NO:2、107、125、129或137多肽;和
    (jj)编码包含如图1和/或图2中所述的共有序列并赋予与参考生物比较更快生长和/或提高的产量的多肽的核酸分子;
    或包含其互补序列。

    4.  如权利要求1至3中任一项所述的方法,其中通过以下方式提高活性:
    (a)提高SEQ ID NO:2、107、125、129或137蛋白质的表达;
    (b)提高SEQ ID NO:2、107、125、129或137RNA的稳定性或SEQID NO:2、107、125、129或137蛋白质的稳定性;
    (c)提高SEQ ID NO:2、107、125、129或137蛋白质的特异活性;
    (d)表达能够提高内源性SEQ ID NO:2、107、125、129或137基因功能表达的同源或人工的转录因子;或
    (e)将提高或诱导SEQ ID NO:2、107、125、129或137活性或SEQID NO:1、106、124、128或136表达的外源性因子添加至食物或培养基。

    5.  如权利要求1至4中任一项所述的方法,其中生物是微生物或优选地是植物。

    6.  如权利要求1至5中任一项所述的方法,其中SEQ ID NO:2、107、125、129或137多肽的活性通过将多核苷酸导入至生物、优选地至植物、或至其一个或多个部分而提高,所述多核苷酸编码由选自如下的核酸分子所编码的SEQ ID NO:2、107、125、129或137多肽:
    (a)编码SEQ ID NO:2、107、125、129或137多肽的核酸分子;
    (b)包含根据SEQ ID NO:1、106、124、128或136的编码序列的至少成熟多核苷酸的核酸分子;
    (c)其序列因遗传密码简并性而衍生自根据(a)或(b)的核酸分子所编码的多肽序列的核酸分子;
    (d)核酸分子,其编码的多肽序列至少20%同一于根据(a)至(c)的核酸分子所编码多肽的氨基酸序列;
    (e)编码多肽的核酸分子,所述多肽通过替换、缺失和/或添加由(a)至(d)的核酸分子所编码多肽的氨基酸序列的一个或多个氨基酸衍生自根据(a)至(d)的核酸分子编码的SEQ ID NO:2、107、125、129或137多肽;
    (f)编码由根据(a)至(e)的任意核酸分子所编码的SEQ ID NO:2、107、125、129、137多肽的片段或表位的核酸分子;
    (g)包含多核苷酸的核酸分子,所述多核苷酸包含使用SEQ ID NO:96和97、122和123、126和127或130和131和/或138和139或其组合的引物通过扩增cDNA库或基因组库所得到的核酸分子的序列;
    (h)编码SEQ ID NO:2、107、125、129或137多肽的核酸分子,所述多肽借助抗由根据(a)至(g)的任意核酸分子所编码的多肽的单克隆抗体分离;和
    (i)核酸分子,其通过严格条件下使用包含根据(a)至(h)的任意序列或者在(a)至(h)中所表征核酸的至少15nt、优选地20nt、30nt、50nt、100nt、200nt或500nt片段的探针筛选适宜文库可得到,并且其编码SEQ ID NO:2、107、125、129或137多肽;
    (j)编码提高生长和产量的包含SEQ ID NO:2、107、125、129或137中所示序列的多肽的核酸分子,所述多肽中20个或更少的所示氨基酸位置可以由X替换和/或其中将20个或更少的氨基酸插入所示序列,或者编码提高生长和产量的包含SEQ ID NO:4、6、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、99、101、103、105或SEQ ID NO:109、111、113、115、117、119、121、133或135中所示序列的多肽的核酸分子,所述多肽中10个或更少的所示氨基酸位置可以由X替换和/或其中将10个或更少的氨基酸插入或从所示序列缺失;
    或包含其互补序列。

    7.  如权利要求1至6中任一项所述的方法,其中编码内源性SEQ IDNO:2、107、125、129或137多肽或活性的多核苷酸功能性地连接至引起SEQ ID NO:2、107、125、129或137多肽提高的表达的调节序列。

    8.  如权利要求1至7中任一项所述的方法,其中产量或生物质得到提高。

    9.  编码提高生长或产量的多肽的多核苷酸,其包含选自如下的核酸分子:
    (a)编码SEQ ID NO:2、107、125、129或137中所述多肽的至少成熟形式或包含SEQ ID NO:1、106、124、128或136中所述多核苷酸的至少成熟形式的核酸分子;
    (b)其序列因遗传密码简并性衍生自根据(a)的核酸分子所编码的多肽序列的核酸分子;
    (c)核酸分子,其编码序列至少30%与由SEQ ID NO:1、106、124、128或136中所述序列所编码多肽的氨基酸序列同一的SEQ ID NO:2、107、125、129或137多肽或包含SEQ ID NO:1、106、124、128或136中所述的序列;
    (d)编码多肽的核酸分子,所述多肽通过替换、缺失和/或添加由(a)至(c)的核酸分子所编码多肽的氨基酸序列的一个或多个氨基酸衍生自由(a)至(c)的多核苷酸编码的SEQ ID NO:2、107、125、129或137多肽;
    (e)编码由根据(a)至(d)的任意核酸分子所编码的SEQ ID NO:2、107、125、129或137多肽的片段或表位的核酸分子;
    (f)包含多核苷酸的核酸分子,所述多核苷酸包含使用SEQ ID NO:96和97、122和123、126和127、130和131或138和139或其组合的引物通过扩增cDNA库或基因组库所得到的核酸分子的序列;
    (g)编码SEQ ID NO:2、107、125、129或137多肽的核酸分子,所述多肽借助抗由(a)至(f)的任意核酸分子所编码的多肽的单克隆抗体分离;
    (h)核酸分子,其通过严格条件下使用包含根据(a)至(g)的任意序列的探针筛选适宜文库可得到并且其编码SEQ ID NO:2、107、125、129或137多肽,
    (i)编码提高生长和产量的包含SEQ ID NO:2、107、125、129或137中所示序列的多肽的核酸分子,所述多肽中20个或更少的所示氨基酸位置可以由X替换和/或其中将20个或更少的氨基酸插入所示序列,或者编码提高生长和产量的包含SEQ ID NO:4、6、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、99、101、103、105或SEQ ID NO:109、111、113、115、117、119、121、133或135中所示序列的多肽的核酸分子,所述多肽中10个或更少的所示氨基酸位置可以由X替换和/或其中将10个或更少的氨基酸插入所述序列;
    或其互补链,根据(a)至(h)的所述多核苷酸或所述核酸分子不包含SEQID NO:2、107、125、129或137中所示序列或与其互补的序列。

    10.  如权利要求9所述的多核苷酸,其为DNA或RNA。

    11.  用于制备载体的方法,其包括将如权利要求9或10所述的多核苷酸插入载体。

    12.  载体,其包含如权利要求9或10所述的多核苷酸或如权利要求11中所述制备。

    13.  如权利要求12所述的载体,其中将多核苷酸功能性地连接至允许在原核或真核宿主中表达的调节序列。

    14.  宿主细胞,其已经用如权利要求12或13所述的载体或如权利要求9或10所述的多核苷酸稳定地或瞬时地转化或转染。

    15.  如权利要求14所述的宿主细胞,其是细菌细胞或真核细胞,优选地是单细胞微生物或植物细胞。

    16.  多肽,其包含由权利要求9或10所述的多核苷酸编码的氨基酸序列,或包含含有SEQ ID NO:2、107、125、129或137中所述序列的提高生长或产量的多肽,其中20个或更少的所示氨基酸位置可以由X替换和/或其中将20个或更少的氨基酸插入至所示序列,或包含含有SEQ IDNO:4、6、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、99、101、103、105或SEQ ID NO:109、111、113、115、117、119、121、133或135中所述序列的提高生长或产量的多肽,其中10个或更少的所示氨基酸位置可以由X替换和/或其中将10个或更少的氨基酸插入或从所示序列缺失;所述多肽不是SEQ ID NO:2、107、125、129或137中所述的序列。

    17.  抗体,其特异性结合至如权利要求16所述的多肽。

    18.  反义核酸,其包含如权利要求9或10所述的多核苷酸的互补序列。

    19.  用于制备转基因植物、植物细胞、植物组织、有用动物的细胞、有用动物或转基因微生物的方法,该方法包括将如权利要求9或10所述的多核苷酸或如权利要求12或13所述的载体导入其基因组。

    20.  非人生物、尤其动物细胞、植物细胞或微生物,其包含如权利要求9或10所述的多核苷酸或如权利要求12或13所述的载体。

    21.  具有SEQ ID NO:2、107、125、129或137活性或蛋白质提高的量的非人生物、尤其植物组织或植物,其包含如权利要求20所述的植物细胞。

    22.  转基因微生物,其具有SEQ ID NO:2、107、125、129或137蛋白质或活性提高的量。

    23.  具有SEQ ID NO:2、107、125、129或137蛋白质或活性提高的量的非人生物、尤其有用动物或动物器官,其包含如权利要求20所述的有用动物的细胞。

    24.  如权利要求21所述的植物的种子、块茎或繁殖材料,其包含如权利要求9或10所述的多核苷酸或如权利要求20所述的植物细胞。

    25.  如权利要求22所述的微生物的生物质,其包含如权利要求16所述的多肽、如权利要求20所述的细胞或如权利要求9或10所述的多核苷酸。

    26.  植物细胞、植物细胞器、植物组织、植物或其部分,其(过量)表达任一的核酸序列SEQ ID NO:1、106、124、128或136,其中干重与保藏在位于德国Corrensstraβe 3,D-06466 Gatersleben的德国植物遗传学与农作物研究所(IPK)、最早保藏日期在2005年6月2日前的品种比较提高1%、2.5%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、50%或更多,并且其中所述植物细胞、所述植物细胞器、所述植物组织、所述植物或其部分的干重意指减去该植物细胞、该植物细胞器、该植物组织、该植物或其部分中所包含水的量的该植物细胞、该植物细胞器、该植物组织、该植物或其部分的有机物质重量。

    27.  植物细胞、植物细胞器、植物组织、植物或其部分,其(过量)表达任一的核酸序列SEQ ID NO:1、106、124、128或136,其中干重与选自如下的品种比较提高1%、2.5%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、50%或更多:
    (a)陆地棉(G.hirsutum)IPK登录号GOS6(D120)、GOS7(ST446)、GOS10(D1635)、GOS17(D4302)或GOS21(D5553),或者亚雷西亚棉(G.areysianum Deflers),或者G.incanum(Schwartz)Hillc.、或者雷蒙德氏棉(G.raimondii Ulbr.)、或者阿拉伯棉(G.stocksii Masters)、或者瑟伯氏棉(G.thurberi Tod.)、或者毛棉(G.tomentosum Nutt.)、或者三叶棉(G.triphyllum Hochr.)、或者钝叶树棉(Gossypium arboreum)IPK登录号GOS13(D1634)、GOS16(D4240)、GOS18(D4505)、GOS19(D4506)、GOS20(D4750)或GOS12(D1329)、或者海岛棉(Gossypium barbadense)或者草棉(Gossypium herbaceum);和
    (b)欧洲油菜(Brassica napus)Mika品种、欧洲油菜Digger品种、欧洲油菜Artus品种、欧洲油菜Terra品种、欧洲油菜Smart品种、欧洲油菜Olivine品种、欧洲油菜Libretto品种、欧洲油菜Wotan品种、欧洲油菜Panther品种、欧洲油菜Express品种、欧洲油菜Oase品种、欧洲油菜Elan品种、欧洲油菜Ability品种、欧洲油菜Mohican品种;和
    (c)亚麻(Linum usitatissimum)Librina品种、亚麻Flanders品种、亚麻Scorpion品种、亚麻Livia品种、亚麻Lola品种、亚麻Taurus品种、亚麻Golda品种、亚麻Lirima品种;和
    (d)玉蜀黍(Zea mays)Articat品种、玉蜀黍NK Dilitop品种、玉蜀黍Total品种、玉蜀黍Oldham品种、玉蜀黍Adenzo品种、玉蜀黍NK Lugan品种、玉蜀黍Liberal品种、玉蜀黍Peso品种;和
    (e)大豆(Glycine max)Oligata品种、大豆Lotus品种、大豆Primus品种、大豆Alma Ata品种、大豆OAC Vision品种、大豆Jutro品种;和
    (f)向日葵(Helianthus annus)Helena品种、向日葵Flavia品种、向日葵Rigasol品种、向日葵Flores品种、向葵Jazzy品种、向日葵Pegaso品种、向日葵Heliaroc品种、向日葵Salut RM品种;和
    (g)亚麻荠(Camelina sativa)Dolly品种、亚麻荠Sonny品种、亚麻荠Ligena品种、亚麻荠Calinka品种;和
    (h)白芥(Sinapis alba)Martigena品种、白芥Silenda品种、白芥Sirola品种、白芥Sito品种、白芥Semper品种、白芥Seco品种;和
    (i)红花(Carthamus tinctorius)Sabina品种、红花HUS-305品种、红花landrace品种、红花Thori-78品种、红花CR-34品种、红花CR-81品种;和
    (j)芥菜(Brassica juncea)Vittasso品种、芥菜Muscon M-973品种、芥菜RAPD品种、芥菜Co.J.86品种、芥菜IAC 1-2品种、芥菜Pacific Gold品种;和
    (k)椰子(Cocos nucifera L.)Maypan、Ceylon Tall、Indian Tall、Jamaica Tall、Malayan Tall、Java Tall、Laguna、KingCRIC60、CRIC65、CRISL98、Mooroek tall、Plus palm tall、San Ramon、Typica、Nana或Aurantiaca品种;和
    (l)普通小麦(Triticum aestivum L.)Altos品种,德国品种局登记号2646、普通小麦Bussard品种,德国品种局登记号1641、或普通小麦Centrum品种,德国品种局登记号2710;和
    (m)甜菜(Beta vulgaris)Dieck 13品种,CPVO登记号19991828、甜菜FD007品种,CPCO登记号20000506或甜菜HI0169品种,CPVO登记号20010315;和
    (n)大麦(Hordeum vulgare)Dorothea品种,CPVO登记号20031457、大麦Colibri品种,CPVO登记号20040122、大麦Brazil品种,CPVO登记号20010274或大麦Christina品种,CPVO登记号20030277;和
    (o)黑麦(Secale cereale)Esprit品种,CPVO登记号19950246、黑麦Resonanz品种,CPVO登记号20040651或黑麦Ursus品种,CPVO登记号19970714;和
    (p)稻(Oryza sativa)Gemini品种,CPVO登记号20010284、稻Tanaro品种,CPVO登记号20020177或稻Zeus品种,CPVO登记号19980388;和
    (q)马铃薯(Solanum tuberosum L.)Linda、Nicola、Solara、Agria、Sieglinde、或Russet Burbank品种;和
    (r)落花生(Arachis hypogaea)疏枝(fastigiata)亚种瓦伦西亚栽培变种;和
    (s)落花生密枝(hypogaea)亚种弗吉尼亚栽培变种′Holland Jumbo′、′弗吉尼亚A23-7′或′佛罗里达-416′品种;和
    (t)落花生茸毛(hirsuta)亚种Peruvian runner栽培变种′SoutheasternRunner56-15′、′Dixie Runner′、或′Early Runner′品种;和
    (u)落花生珠豆(vulgaris)亚种西班牙栽培变种′Dixie Spanish′、′改良西班牙2B′、或′GFA西班牙′品种;
    并且其中干重意指减去该植物细胞、该植物细胞器、该植物组织、该植物或其部分中所包含水的量的该植物细胞、该植物细胞器、该植物组织、该植物或其部分的有机物质重量。

    28.  用于制备精细化学品的方法,其包括提供具有提高的SEQ ID NO:2、107、125、129或137活性的细胞、组织或非人生物和在允许于所述细胞、所述组织或所述生物中产生目的精细化学品的条件下培养所述细胞、所述组织或所述生物。

    29.  SEQ ID NO:2、107、125、129或137多肽或如权利要求8或9所述的多核苷酸或如权利要求16所述的多肽的用途,用于与起始生物比较提高非人生物的产量和/或提高生长。

    30.  非人生物,其具有与参考生物比较如权利要求16所述的多肽提高的活性并且具有与参考生物比较对非生物性或生物性胁迫提高的耐受。

    31.  用于鉴定赋予提高的生长和/或产量的基因产物的方法,其包括如下步骤:
    (a)将样品的核酸分子,其可含有编码在表达后赋予生长和/或产量提高的基因产物的候选基因,与权利要求9的核酸分子接触;
    (b)鉴定与权利要求9的核酸分子在放松的严格条件下杂交的核酸分子;
    (c)将候选核酸分子导入适用于测量提高的生长和/或产量的宿主细胞;
    (d)在宿主细胞中表达已鉴定的核酸分子;
    (e)测定宿主细胞中提高的生长和/或产量;和
    鉴定在表达后其表达赋予宿主细胞中与野生型相比较提高的生长和/或产量的核酸分子和它的基因产物。

    32.  用于鉴定赋予提高的生长和/或产量的基因产物的方法,包括如下步骤:
    (a)鉴定数据库中生物的核酸分子,其可含有编码在表达后赋予生物或其部分的生长和/或产量提高的基因产物的候选基因,并且其与权利要求9的核酸分子至少30%同源;
    (b)将候选核酸分子导入适用于监测提高的生长和/或产量的宿主细胞;
    (c)在宿主细胞中表达已鉴定的核酸分子;
    (d)测定宿主细胞中提高的生长和/或产量水平;和
    (e)鉴定在表达后其表达赋予与野生型相比较宿主生物中提高的生长和/或产量的核酸分子和它的基因产物。

    33.  如权利要求9所述的核酸分子的用途,用于鉴定赋予提高的生长和/或产量的核酸分子。

    34.  如权利要求9所述的核酸分子在作图和育种方法中的用途,用于鉴定具有提高的生长和/或产量的植物品种。

    35.  如权利要求9所述的核酸分子的用途,用于产生对抑制植物中SEQ ID NO:2、107、125、129或137活性的除草剂抵抗的除草剂抗性植物。