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    广西11选5开奖走势: 副猪嗜血杆菌病、猪链球菌病二联灭活疫苗及其制备方法.pdf

    摘要
    申请专利号:

    广西11选5大小走势图 www.fnjpv.tw CN201110406601.9

    申请日:

    2011.12.08

    公开号:

    CN103157100B

    公开日:

    2014.09.24

    当前法律状态:

    授权

    有效性:

    有权

    法律详情: 授权|||实质审查的生效IPC(主分类):A61K 39/116申请日:20111208|||公开
    IPC分类号: A61K39/116; A61P31/04; A61K39/09(2006.01)N; A61K39/102(2006.01)N 主分类号: A61K39/116
    申请人: 普莱柯生物工程股份有限公司
    发明人: 张许科; 孙进忠; 白朝勇
    地址: 471000 河南省洛阳市高新区凌波路
    优先权:
    专利代理机构: 北京聿宏知识产权代理有限公司 11372 代理人: 吴大建;孙明岩
    PDF完整版下载: PDF下载
    法律状态
    申请(专利)号:

    CN201110406601.9

    授权公告号:

    103157100B||||||

    法律状态公告日:

    2014.09.24|||2013.07.24|||2013.06.19

    法律状态类型:

    授权|||实质审查的生效|||公开

    摘要

    本发明涉及一种副猪嗜血杆菌病、猪链球菌病二联灭活疫苗及其制备方法,该疫苗由已灭活的副猪嗜血杆菌血清4型JS株、5型ZJ株和猪链球菌2型SC株作为抗原,以及兽医学可接受的佐剂制成,可同时免疫预防由副猪嗜血杆菌引起的副猪嗜血杆菌病和猪链球菌引起的猪链球菌病及二者的混合感染,该疫苗副作用小,不含内毒素和血清中不含杂蛋白,具有较好的免疫安全性,临床上达到一针多防的效果,降低成本,并可以满足不同用户的要求。

    权利要求书

    权利要求书一种副猪嗜血杆菌病、猪链球菌病二联灭活疫苗,包括:抗原和佐剂,其中,所述抗原包含副猪嗜血杆菌血清4型JS株、5型ZJ株和猪链球菌2型SC株的灭活抗原浓缩?重悬稀释液。
    根据权利要求1所述的疫苗,其特征在于:所述副猪嗜血杆菌血清4型JS株、5型ZJ株和猪链球菌2型SC株灭活抗原浓缩?重悬稀释液的总含量为疫苗总量的50%~90%(V/V),所述佐剂含量为疫苗总量的10%~50%(V/V)。
    根据权利要求2所述的疫苗,其特征在于:所述副猪嗜血杆菌血清4型JS株、5型ZJ株和猪链球菌2型SC株灭活抗原浓缩?重悬稀释液的体积比为2∶2∶1~4∶4∶1。
    根据权利要求3所述的疫苗,其特征在于:所述疫苗含副猪嗜血杆菌血清4型JS株灭活抗原浓缩?重悬稀释液灭活前活菌数不少于1.0×109CFU/mL;所述副猪嗜血杆菌血清5型ZJ株灭活抗原浓缩?重悬稀释液灭活前活菌数不少于1.0×109CFU/mL;所述猪链球菌2型SC株灭活抗原浓缩?重悬稀释液灭活前活菌数不少于5×108CFU/mL。
    根据权利要求1所述的疫苗,其特征在于:所述佐剂为兽医学可接受的水性佐剂,包括铝盐系列佐剂、Montanide IMS系列佐剂或Montanide GEL系列佐剂,蜂胶,免疫刺激复合物,双向佐剂206,水包油性系列佐剂,细胞因子类佐剂,核酸及其衍生物类佐剂,卵磷脂类佐剂;其中,铝盐系列佐剂的疫苗中,三种灭活抗原浓缩?重悬稀释液的总含量为75%~85%(V/V),佐剂含量为15%~25%(V/V);Montanide IMS系列佐剂的疫苗中,三种灭活抗原浓缩?重悬稀释液的总含量为50%~60%(V/V),佐剂含量为40%~50%(V/V);MontanideIMS系列佐剂的疫苗中,三种灭活抗原浓缩?重悬稀释液的总含量为75%~90%(V/V),佐剂含量为10%~25%(V/V)。
    根据权利要求1所述的疫苗,其特征在于:所述疫苗中还含有防腐剂,包括硫柳汞或二甲基汞或叠氮钠,其含量为疫苗总量的0~0.01%(V/V)。
    一种权利要求1~6中任意一项所述疫苗的制备方法,包括:
    步骤A,将副猪嗜血杆菌血清4型JS株、5型ZJ株和猪链球菌2型SC株分别进行繁殖制备其生产用毒株,并对该产物进行纯粹检验;
    步骤B,将副猪嗜血杆菌血清4型JS株、5型ZJ株和猪链球菌2型SC株生产用毒株分别接种到其制苗用培养基中进行增殖培养制得抗原液,并对该产物进行纯粹检验及活菌计数;
    步骤C,副猪嗜血杆菌血清4型JS株、5型ZJ株和猪链球菌2型SC株抗原液分别经灭活制得其灭活抗原液,并对该产物进行灭活检验和安全性检验;
    步骤D,副猪嗜血杆菌血清4型JS株、5型ZJ株和猪链球菌2型SC株灭活抗原液分别经浓缩制得其灭活抗原浓缩液;
    步骤E,将副猪嗜血杆菌血清4型JS株、5型ZJ株和猪链球菌2型SC株灭活抗原浓缩液与佐剂混合乳化制备副猪嗜血杆菌病、猪链球菌病二联灭活乳剂疫苗,并对该产物进行无菌检验、安全检验和效力检验;
    步骤F,副猪嗜血杆菌病、猪链球菌病二联灭活乳剂疫苗分装、贮存;
    其特征在于:步骤E包括用稀释剂将副猪嗜血杆菌血清4型JS株、5型ZJ株和猪链球菌2型SC株的抗原浓缩液重悬稀释;将所获得的三种抗原浓缩?重悬稀释液混合,再加入佐剂混合乳化,并在乳化结束前加入防腐剂,制得副猪嗜血杆菌病、猪链球菌病二联灭活疫苗。
    根据权利要求7所述的方法,其特征在于:步骤E中所述稀释剂为生理盐水;所述重悬稀释包括:将副猪嗜血杆菌血清4型JS株、5型ZJ株的抗原浓缩液稀释至浓度为2.5×109CFU/mL~4.5×109CFU/mL,将猪链球菌2型SC株的抗原浓缩液稀释至浓度为5.0×109CFU/mL~5.5×109CFU/mL。
    根据权利要求7所述的方法,其特征在于:步骤B中所述制苗用培养基包括:副猪嗜血杆菌培养基及其辅助因子,猪链球菌培养基及其辅助因子;其中,所述副猪嗜血杆菌培养基为胰酪胨大豆肉汤培养基,其辅助因子包括小牛血清、葡萄糖;所述猪链球菌培养基为改良马丁肉汤培养基,其辅助因子包括犊牛血清、葡萄糖。
    根据权利要求7所述的方法,其特征在于:步骤D采用切向流超滤系统进行浓缩,并同时除去毒素和杂蛋白,所用超滤膜的截留分子量为500KD~1000KD。

    关 键 词:
    嗜血 杆菌 链球菌 二联 疫苗 及其 制备 方法
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